看似按部就班的ELISA实验,实则步步惊心,每一个细节都能决定成败。
不同厂家对于elisa试剂盒的操作要求也不尽相同,有些需要放置-20℃,有些则需要4℃保存,即使是同样的试剂盒,每个人对说明书的解读也有万千差异,以洗板后的拍板为例,一千个人阅读说明书,就有一千种拍板方式。不少人甚至认为ELISA操作是个体力活,拿出科比扣篮的架势;还有小伙伴突发奇想,让孔板自然干燥,最终出现了读数高、CV值高、背景高的「三高」结果。此时若有一则操作视频指导,便能一目了然。
一、说明书中洗板步骤
Manual:Discard the solution in the plate without touching the side walls.Clap the plate on absorbent filter papers or other absorbent material.Fill each well completely with 350ul wash buffer and soak for 1 to 2 minutes,then aspirate contents from the plate,and clap the plate on absorbent filter papers or other absorbent material.
因此,除了操作说明书上详尽的操作步骤,我们更是精心制作出ELISA试剂盒的教学视频,以方便初学者在首次使用,视频内容包括操作步骤、实验细节、注意事项等,手把手带您入门,确保实验的每一步都顺利进行。
二、实验小贴士
1.在收到试剂盒后,为保证检测效果,需要根据说明书中保存条件正确储存。除非特别注明,试剂盒大多是在
2~8°C条件下储存;
2.在实验进行前,请确认包装中的试剂盒成分与说明书一致,再进行后续操作;
3.溶解标准品过程中,注意标准品是否受潮,过程中要避免产生泡沫;
4.为了避免交叉污染,配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽;
5.每次孵育时,正确使用封板胶纸可保证结果的准确性;
6.正确洗板有助于实验结果的稳定性;
7.TMB显色底物在上板前应为无色,请避光保存。加入孔板后,将由无色变成不同程度的蓝色;
8.终止液上板顺序需与底物上板顺序一致,加入终止液,溶液颜色由蓝色变为黄色。如果出现绿色,即表明终止液与底物未混匀,请充分混合。