一、ELISA原理介绍
ELISA即酶联免疫吸附实验，其基本原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。ELISA技术作为免疫标记技术（包含免疫荧光技术，免疫放射技术，免疫酶技术和免疫胶体金技术）中的一种，已广泛应用于科研和临床实验中，具有快速 、定性或者定量甚至定位的特点。
ELISA可用于测定抗原 ，也可以测定抗体 。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体；②酶标记的抗原或抗体；③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检验方法。常用的几种方法有双抗体夹心法，间接法测抗体，竞争法，双抗原夹心法测抗体 ，捕获法测抗体。
双抗体夹心法，其基本原理是将一定量的包被抗体以物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面 ，加入无关蛋白载体封闭未结合位点，然后加入含有抗原的待测样品，通过加入酶标记特异性抗体后用TMB底物显色，微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈正相关 。该方法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，不适用于测定半抗原及小分子单价抗原 ，因其不能形成两位点夹心。
间接法，将抗原与固相载体相连结 ，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。加入特异性一抗与固相抗原相结合 ，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，加酶标二抗。固相免疫复合物中的抗体与酶标二抗结合 ，从而间接地标记上酶。洗涤后 ，加底物显色,微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈正相关。
竞争法，其基本原理是将合适浓度的包被抗体包被于微孔板中，加入无关蛋白载体封闭未结合位点，加入标准品（样本）和生物素标记的抗原物质进行竞争结合 ，经合适的温度和一定时间的孵育 ，洗涤后 ，加入HRP标记的链霉亲和素进行反应 ，TMB显色，微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈负相关。
双抗原夹心法，将合适浓度的包被抗原包被于微孔板中 ，加入无关蛋白载体封闭未结合位点 ，然后加入含有抗体的待测样品和标准品。孵育后 ，用洗涤缓冲液除去未结合的偶联物。然后加入生物素化的检测抗原 ，与包被抗原偶联抗体抗原复合物结合 。洗去未结合的偶联物后，加入酶标链霉亲和素 。第三次洗涤后 ，加入TMB底物观察HRP酶促反应。TMB经HRP催化生成蓝色产物，加入酸性停止液后变为黄色。在酶标仪上读取450nm处的od吸光度。
捕获法，以检测某种抗原的IGM抗体为例，其基本原理是先将针对IgM的二抗包被于固相载体，加入待测标本，其中IgM类抗体可被固相抗体捕获 ，再加入特异性抗原 ，其与固相上捕获的IgM抗体结合后，加入酶标记抗体 ，形成固相二抗-IgM-抗原-酶标记抗体复合物 ，加底物显色后，即可对待测标本中IgM是否存在及含量进行测定。
二 、js3333线路检测中心生物ELISA产品优势
1.原料自产
试剂盒开发生产中蛋白抗体原料的质量对试剂盒品质影响至关重要。js3333线路检测中心生物拥有自己的蛋白和抗体研发生产平台，原料大部分可以实现自产，质量完全可控。另外js3333线路检测中心生物拥有自己的细胞库 ，血液组织样品库 ，可以提供更丰富和全面的数据验证 ，便于客户自行选择满足实验需要的产品。品种广泛的蛋白抗体原料也是我们能根据市场（客户）需求快速调整或者定制试剂盒产品的基础 。
2.多维度质控
js3333线路检测中心生物对试剂盒各组件生产严格质控环节 。js3333线路检测中心生物拥有1000平以上的万分之一级别GMP车间，最大程度保证生产环境的洁净度 ，提高产品的可靠性。通过使用高精密机器生产，和严格的质控抽检，保证批次差小于5% ，同时进行广泛的试剂盒性能测试，以满足客户对特异性，准确度和灵敏度的要求。另外，通过在ELISA试剂盒开发过程中生成高纯度的内控校正蛋白，用于不同批次试剂盒标准品的校正 ，进而保证不同批次间试剂盒检测数据的一致性。所有批次的试剂盒均经过内控校正蛋白校对 ，不会出现任何结果偏差。
3.试剂优化降低检测干扰
影响免疫测定的特异性的因素主要包含抗体原料的交叉反应和样本基质环境的干扰效应。交叉反应是指，无关物质被抗体对识别而导致结果出现假阳性。干扰效应是指，样本基质中的其他物质可改变抗原-抗体间结合，而阻止目标分析物被检测出来。这些干扰成分种类众多，一类是干扰性抗体 ，如众所周知的人抗鼠抗体（Human anti-mouse Antibodies ，HAMA） 、一般的抗动物抗体、嗜异性抗体（Id）或类风湿因子（rheumatoid factors，RF） ；一类是样品中的内源性物质引起 ，如高脂和高盐浓度、高粘度可以导致目标分析物被封闭、产生交叉反应；另外高度丰富的血清内源性蛋白，如白蛋白 、补体因子、溶血酶 、α-1抗胰蛋白酶或纤维蛋白原等都会干扰免疫分析。
试剂盒经合适的优化和测试 ，这些问题都可被缓解。假阳性结果可能由样本的基质效应引发的，这些基质效应只有经过多次验证和质控测试才能被确认。这就是为什么一个成功的ELISA试剂盒不能仅仅只通过信号产生与否来评判，而应看信号是否由目标分析物而产生的 。这种情况大多数可通过线性稀释实验来进行验证。
为保证试剂盒特异性，我们主要有这3方面的努力，从原料上精选单克隆抗体和多克隆抗体对；从反应溶液体系上优化包被缓冲液 、样本稀释液和抗体稀释液来抵抗基质效应；从测定物本身特性优化 ，天然抗原和重组蛋白抗原与捕获抗体结合力的强弱由于结合后蛋白构象的改变而不同进而会影响检测值的区别 。
js3333线路检测中心生物检测试剂相比传统试剂
1.背景低 ；2.样本检测CV值小；3.性价比高；4.更低检测限度 。
4. 更高灵敏度: 可检测fg/mL级别的蛋白
最小能检测值是区别于空白值所能观测到的最低的统计值。它是通过标准曲线空白点多个复孔的2倍标准差与平均值之和 ，并按照标准曲线值计算而来。灵敏度越高 ，可用的动力学范围（标准曲线范围）越宽。ELISA试剂盒经过Accquant信号放大系统优化可保证高信号强度，低背景和最优的检测灵敏度，最低可达fg/mL级别。
例如：Human HS-IL-6(High sensitive Interleukin 6) Accquant ELISA Kit
用途 ：用于体外定量检测人血清 ，血浆，细胞培养上清或其它生物样品中的IL-6
检测范围 ： 0.078-5pg/ml
灵敏度 ：0.046pg/ml
实验方法 ：双抗体夹心法
检测时长：4 小时(不含平衡和样品准备时间)
单孔样品最大用量 ：血清 50ul ，血浆 50ul，细胞培养上清 50ul
特异性：特异性和 IL-6 结合 ，与其它类似物无明显交叉反应
储存条件 ：未启封试剂盒 2-8°C(严禁冻存)，6 个月
组件 ：
结果：
5.试剂盒稳定性
js3333线路检测中心生物自主开发的稳定系统可以让试剂盒在40度的环境下存放一周 ，活性不低于95%。大部分试剂盒可以在4度存放两年活性依然能保持85-95%。基本不影响试剂盒工作和结果的准确性 。这同时也方便了运输，以及让客户拥有了分多次使用试剂盒的机会。
6. 更高的客户满意度
99.5%客户对我们的产品满意无任何售后反馈，0.5%售后通过提供技术支持得到专业的响应和解决。
技术支持团队和开发团队 、包装运输人员 、销售代表同一栋大楼办公，在售后服务过程中可得到必要的资源支持，无障碍快速解决客户问题 。
我们的技术支持能够解决任何产品性能问题，从提供更详细的技术指导到重发更换产品 。如果产品性能问题仍然存在，我们的技术团队确保通过内部审查，以纠正和改进未来的产品性能。
为了方便客户了解和使用我们的产品 ，js3333线路检测中心生物在官网上也增加专门的技术支持板块，包括精准显色、数据处理、样本制备等检测常见问题及解决方案，内容同时以文本和视频方式呈现。如果客户实验室不具备自行检测条件，我们还提供代测服务。
js3333线路检测中心生物试剂盒产品从2016年至今，被国内外多所大学 、研究机构和药学平台使用并发表文献达2600余篇 ，总影响因子8000余分，最高影响因子46.351分 ，每年引用js3333线路检测中心生物产品的文献数量、影响因子都在快速增长 ，文献发表于Cell Research、Cell、Advanced Materials、Annals of the Rheumatic Diseases 、Materials Today、Cellular & Molecular Immunology、Journal of Medical Virology等最前沿科学期刊 ；公司凭借优异的产品和完善的服务体系受到广大国内外用户的青睐和认可 。
